A tuberculose (TB) é uma doença infectocontagiosa. Segundo o Ministério da Saúde, foram registrados 66.796 casos novos de tuberculose em 2016. As técnicas que utilizam a amplificação de DNA por reação em cadeia de polimerase (PCR) são descritas como as mais sensíveis para o diagnóstico de tuberculose. Alguns estudos indicam que os resultados da PCR dependem amplamente do método utilizado para extração de DNA. A detecção precoce do bacilo e da resistência aos fármacos do tratamento, é essencial para um tratamento adequado e eficaz. O objetivo do trabalho é detectar DNA de M. tuberculosis por PCR em tempo real diretamente de amostras clínicas de escarro. O estudo utilizou 30 amostras clínicas de escarro. 10 positivas para TB, confirmadas pelos métodos bacteriológicos (baciloscopia e cultura) e 10 negativas nos mesmos métodos. Também foram utilizadas 10 amostras clínicas de escarro negativas para TB contaminadas com a cepa de referência de Mycobacterium bovis. Todas as amostras tiveram o DNA extraído pela mesma técnica e amplificados por PCR em tempo real através da detecção da sequência de inserção IS6110. As amostras positivas foram confirmadas positivas para tuberculose em tempo real.