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Com a incorporação de nanopartículas (NPs) em produtos comerciais, é fundamental compreender como elas interagem com os organismos vivos. A inalação de compostos de níquel é um perigo que está associado com o desenvolvimento de inflamação pulmonar, fibrose e câncer. No entanto, os mecanismos de toxicidade pulmonar destes materiais permanecem indefinidos. Diante deste panorama, o presente estudo buscou verificar a atividade tóxico-genética de NPs de NiO em células V79 de hâmster Chinês. A caracterização das NPs de NiO por microscopia de transmissão mostrou que houve predominância de partículas da ordem de 110 a 140 nm. Os resultados obtidos com a avaliação de danos no DNA no ensaio cometa mostraram que as concentrações de 62 – 500 µg/mL foram genotóxicas para as células V79 com uma relação dose - efeito. Os resultados do presente estudo somados aos dados obtidos na literatura científica indicam que NPs de NiO são genotóxicas in vitro. Assim, a avaliação de diferentes parâmetros genéticos é fundamental para a ampliação do conhecimento e da caracterização do perfil de nanotoxicidade destes materiais.